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    PCR檢測試劑盒的特點及其依據的檢測步驟

    點擊次數:1886  更新時間:2021-11-26
       PCR檢測試劑盒利用離心柱內硅基質膜提取豬偽狂犬病毒DNA,以此為模板,在特異引物和TaqDNA聚合酶的作用下,經高溫變性,低溫退火、中溫延伸的循環,使特異的DNA的片段拷貝數放大一倍。經過30次循環,使擴增的DNA的片段放大數百萬倍。將擴增的DNA的片段進行電泳,經染色后在紫外燈照射下,肉眼可見DNA的片段的擴增帶,進而判斷待檢樣本中是否含有豬偽狂犬病毒。
     
      PCR檢測試劑盒具有下列特點:
      1.根據DHBV的保守序列設計的引物,與相關病毒無交叉反應。
     
      2.靈敏度比常規PCR高2-3個數量級,可以達到幾百拷貝/反應。
     
      3.即開即用,用戶只需要提供樣品模板,操作簡單,定量準確快速。
     
      4.一管式熒光定量PCR檢測,避免后續污染。
     
      5.足夠50次20μL反應體系的熒光定量PCR。
     
      PCR檢測試劑盒的檢測步驟:
      1.核酸提取
      樣品進行適當處理后,可采用核酸提取試劑盒,該試劑盒可用于對樣本中病毒RNA的提取,請按照說明書進行操作。也可選擇其他合適的商品化產品。
     
      2.擴增試劑的準備
      將各試劑按照用量加入無菌離心管中,充分混勻,短暫離心后在PCR反應管中分別加入18μL混合液。
     
      3.加樣
      將制備好的樣本,陰性對照,陽性對照各取2μL分別加入對應反應管中,加完后蓋緊PCR反應管蓋,置于PCR儀上。
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