維生素CELISA試劑盒利用的夾心法原理。微孔中包被了羊抗兔抗體。之后加入的液態抗體可以結合到抗原分子的一個抗原決定簇上，而抗原分子可在溫育期內結合到固相抗體上。樣品中的抗原與酶標二抗一起在微孔內溫育，此酶標二抗可結合到抗原分子上的另一不同表位上。加入底物液后，溶液所顯示的顏色強度與樣品中抗原的量成正比。樣品的結果可直接從標準曲線上讀取。
維生素CELISA試劑盒的精密度和準確度
精密度
試劑的瓶間差異、批內精密度和批間差異三組測定的平均值之間應無顯著差異，否則，試劑盒的均一性不符合要求：
1.瓶間差異：同一試劑盒，取10瓶試劑復溶，測定同一樣品的含量，求平均值、標準差、變異系數。
2.批內精密度：同一樣品用同一瓶試劑測定10次，求平均值、標準差、變異系數。
3.批間差異：同一樣品，用不同批號的10瓶試劑測定，求平均值、標準差、變異系數。
準確度
通常以回收率、定值血清的靶值范圍、對照試驗及干擾試驗的結果來分析判斷：
1.回收試驗回收率越接近100，準確率越高，一般以100±5%為合格。
2.定值血清的測定對于某些無法準確加入標準物的試劑盒，可用低、中、高濃度的定值血清進行測定，測得值符合定值血清的靶值范圍(±2S)為合格。
3.對照試驗將被檢試劑盒與*的參考方法同時測定若干樣本，計算兩組結果的相關系數和直線回歸方程。
4.非特異性與干擾試驗對維生素C、黃疸、溶血、乳糜等因素的耐受程度，干擾值越小越好。
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