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    亮發光桿菌總數操作失誤如何避免

    點擊次數:746次  更新時間:2017-08-11

    亮發光桿菌總數”是評價食品衛生質量的重要指標,其檢測工作在某種程度上具有相當的不可比性,這就要求檢測人員要嚴格執行科學的操作程序。GB/T4789.2 中只是簡要提到了檢測程序,對實際操作過程中容易出現的問題未作詳細說明。本人通過實踐及多次對比試驗,現就檢測中容易出現的問題,作一闡述。

    樣品的制備和稀釋倍數的選擇

    對于冰凍的樣品,在接種前要放到0~4℃的冰箱中解凍。固體樣品要用滅菌刀或鑷子從不同部位采取試驗材料并混合,在無菌操作下充分研細,混勻,做成均勻稀釋液。樣品制備的整個過程都應在無菌狀態下進行,以防污染。任何樣品在打開包裝前,都要在取樣開口處的周圍表面進行消毒。以上過程的誤操作是:冰凍樣品的解凍時間過長,導致細菌增殖,使實測結果偏高;固體樣品取樣不均衡,稀釋液未充分混勻,使所測結果準確度降低;取樣時未進行外包裝消毒,引起樣品污染。

    充氣飲料應在無菌條件下進行排氣;酸性樣品用經過滅菌的20~30% 碳酸鈉溶液調整pH 值到中性;含鹽量較高的樣品應用滅菌蒸餾水進行稀釋。誤操作是:充氣飲料未經排氣,使樣品接種量偏低;酸性樣品未調pH 值,使不適合酸性狀態下生長的細菌受抑制;高鹽樣品仍用生理鹽水進行稀釋,使不適于高鹽狀態下生長的細菌受抑制,結果均使實測值偏低。

    不同的食品其「菌落總數」的檢出*也不一致。醬油、奶制品、熟肉制品等細菌含量一般偏高,稀釋度可相應選擇較大的,如1:100 和1:1000 等,而飲料、糕點類樣品中細菌量偏低,稀釋度應選擇較小的,如液體樣品可選原樣,固體樣品選1:10 等。誤操作是或者選擇的稀釋度過大,使得菌落生長,或者稀釋度過小,菌落生長密度高,難以計數,導致實測結果或偏高或偏低。

    接種、培養過程中應注意的問題

    接種時,用移液管吸取稀釋液不應用吸球,而要用管口上部塞有脫脂棉球的經過高溫烘烤的移液管,并且用嘴吸取,以防產生交叉污染。稀釋液加入平皿后,應在盡可能快的時間內傾入瓊脂(傾倒瓊脂時,應保證瓊脂溫度在50~60℃,溫度過高,易殺死細菌;溫度過低,則瓊脂提前凝固,導致檢測失?。?,并立即在桌面上推旋平皿,使樣液與瓊脂混合均勻,切忌推旋動作過大,將瓊脂濺到平皿蓋上,影響測定結果。

    平皿內瓊脂凝固后,不要長久放置后才翻轉平皿培養,而應在瓊脂凝固后立即將平皿翻轉予以培養,這樣可避免菌落蔓延生長,難以計數。

    配制、分裝稀釋液或傾注平板不能在日光直射下進行,以防強烈的日光將細菌殺死。

    在培養時,恒溫培養箱的溫度不能過高,以免出現蔓延生亮發光桿菌的趨勢,但也要防止因通風和空氣循環而造成的培養基太干,而影響細菌的正常生長。
    ≥98%            Ursolic acid    *:    烏索酸            規格:
    ≥98%            Schisanlactone E    *:    五內脂            規格:
    ≥98%    Schisandrin C    *:    五味子丙素    規格:
    ≥98%    sipeimine    *:    西貝堿    規格:
    ≥95%            Crocin II    *:    西紅花苷Ⅱ    規格:
    ≥98%            Sirolimus    *:    西羅莫司    規格:
    亮發光桿菌

     

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