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    PCR檢測試劑盒在整個檢測過程中的注意事項

    點擊次數:878次  更新時間:2020-03-24
       PCR檢測試劑盒采用一步法實時熒光反轉錄聚合酶鏈式反應(One-StepRealTimeRT-PCR),結合Taqman技術,對特異核酸進行定性或定量檢測。用于對AIV進行檢測,有助于對AIV的實驗室診斷、監測和流行病調查。
      結果成立原則
      陽性對照:CT值<30并有明顯的擴增曲線。
      陰性對照:無CT值或者CT值>37,線性為直線或者輕微斜線,無明顯擴增曲線。
      以上要求需同時滿足,否則本次實驗無效,需要重新進行。
     
      PCR檢測試劑盒在整個檢測過程中的注意事項:
      1.整個檢測過程應嚴格按照本說明書要求分別在試劑準備區、樣本處理區和PCR擴增區進行操作,各區實驗服、儀器、耗材應獨立使用,不能混用;實驗用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區應配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進行操作;三個區應該配有紫外線殺菌裝置。
     
      2.為避免RNA降解,樣本處理過程應在0-4℃條件下操作,且完成實驗后立即上機檢測;樣本處理過程中使用的器具耗材應經過無核酶處理。
     
      3.每次實驗應該設置陰、陽性對照。
     
      4.試劑盒所有試劑在使用前應該在常溫下充分融化混勻,并應瞬時離心。
     
      5.試劑盒內所配陰性和陽性對照在使用前應全部轉移至標本準備區,并單獨存放。
     
      6.為防止熒光干擾,應避免裸手直接接觸PCR反應管,并應避免在PCR反應管上進行任何標記。
     
      7.儀器擴增相關參數應按照本說明書相關要求進行設置;不同批號試劑不能混用。
     
      8.ABI系列熒光定量PCR儀參數設置中不選ROX校正,淬滅基因選擇None。
     
      9.實驗過程中產品的廢棄物應該進行無害化處理后方可丟棄。
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