原代細胞是直接從包括血液和骨髓組織分離的細胞。這些細胞在生物過程、疾病進展和藥物開發的研究中非常重要，并可應用于體外細胞實驗、人源化小鼠建模及異種移植。與建立好的細胞系相比，保留了起源組織的關鍵特征，更能準確地反映供者間的固有變異性，包括HLA類型和CMV狀態。提高了細胞培養系統的生理相關性，得到的實驗結果更具有體內預測價值。
分離的注意事項：
貼壁型原代細胞
1)原代培養的分離細胞在初次接觸體外環境時，它們之間會互相影響，在這些細胞之間能產生一些促生長的活性物質，使細胞彼此互相促進存活和生長。如果接種的細胞密度過低，細胞之間的促生長作用很小，也很難使細胞適應從體內的組織環境到被分散后進入獨立生存環境的變化過程。如果接種的細胞密度過大，會導致營養物質供應不足，代謝廢物積累較快需要經常換液和傳代。
2）適當增大原代培養接種的細胞密度，給培養的細胞提供更多的類似于在體內時細胞之間的相互作用，會極大提高原代培養的細胞在體外存活率。待細胞適應體外環境后進行傳代培養時再以較低的密度接種和培養。
3）盡快使接種的細胞貼壁，是決定培養能否成功的關鍵?？梢栽诮臃N后先將培養瓶置培養箱內培養3h到5h，待細胞貼壁后，再補足培養液繼續培養。
懸浮型原代細胞
1）必須保持細胞的懸浮狀態?？梢酝ㄟ^增加培養液的黏度來幫助細胞呈懸浮狀態，如給培養液中加入低濃度的透明質酸復合物。在有攪拌裝置的培養器皿內加入培養液，以5ml為較低限度，否則攪拌時會產生氣泡對細胞造成傷害。使用這種方式需注意勿使攪拌速度過快，否則即可使培養液溢出又容易造成污染。如果培養液的量在5ml以下，可以采用旋轉瓶培養。給懸浮培養的細胞換液時要注意不要吸出細胞。
2）能夠進行懸浮培養的細胞，其生命力一般都比較旺盛，體外分裂增殖的速度較快，營養成分消耗大，換液時間隔一般較短。
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